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编 号：F753834
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CAS No: 257277-27-3
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生物活性：
PKH67 is a fluorescent cell binding dye with green fluorescence. PKH67 can stain the cell membrane and the Ex/Em is 490/502 nm. PKH67 is often used in combination with the non-specific red fluorescent dye PKH26 (Ex/Em=551/567 nm) to label cells, detect cell proliferation in vitro, and trace cells in vitro and in vivo.
体外研究：
1.?染色液制备（1）从冰箱中取出 PKH 67 试剂，静置?分钟?室温，或者 37°C ?浴?刻后，离?盛放 PKH 67 的管?，开盖前请务必离??分钟让试剂充分落?管底后才能开盖。（2）根据需要检测的细胞样品数，?稀释液将探针 10 倍稀释，再?合适的溶液(如：??清培养基，HBSS 或 PBS)将 PKH 67 ?液 25 倍稀释，配制成染??作液。最佳?作液浓度请根据不同细胞和??的实验体系来调整。?般细胞使?按试剂盒中的?液的终浓度 250 倍稀释即可，有些细胞可能需要适当增加浓度。2. 细胞染色（1） 将制备好的待测细胞? 100μL 染??作液重悬，?细胞浓度?约 107/mL。也可以进行原位染?，染?液足够够覆盖细胞即可。（2） 在2-8 °C培养细胞 15-30分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。（注：建议待标记细胞在染??作液中于 37°C 孵育 5 min，再于 4°C 孵育 15 min。低温孵育可降低细胞对染料的内吞作?，有助于染料对质膜的标记，并且降低染料定位细胞质囊泡的可能性。）（3） 离?后去上清，收集细胞，?PBS或??清培养基洗涤细胞 1-2 次，最后加? PBS 或??清培养基重悬细胞。（4） 取 500μL 细胞悬液，?流式细胞仪检测。Ex/Em=490/502 nm。（5） 随后还可按照细胞的正常培养?法进?培养。（6）?可以在荧光显微镜下直接观察标记效果，也可以在培养适当时间后再?流式细胞仪检测细胞增殖，或?于其他特定实验?的的细胞荧光?踪。注意事项（1）染?浓度根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少?异。（2）配制的 PKH 67 ?液极易?解，建议分装保存， ≦-20°C冷冻?燥保存。（3）PKH 67 ?作液应现配现?，不能提前配制，因为 PKH 67 吸?会分解，影响染?效果。（4）PKH 67 易被?解，在?溶液中会很快变质。?液请在使?过程中避免接触?。?作液在标记细胞的过程中和?接触是在许可的时间范围内的。（5）PKH 67 荧光染?剂为?醇溶液，在 4°C、冰浴等较低温度情况下会凝固?粘在离?管管底、管壁或管盖内，从冰箱取出后恢复?室温，变成液体状态后离??管底部再开盖。可以 37°C ?浴?刻?全部融解后使?。（6）不同的细胞种类标记后可以?踪的代次或时间差异较?，请根据实际情况或参考?献进?检测。
PKH67 is a fluorescent cell binding dye with green fluorescence. PKH67 can stain the cell membrane and the Ex/Em is 490/502 nm. PKH67 is often used in combination with the non-specific red fluorescent dye PKH26 (Ex/Em=551/567 nm) to label cells, detect cell proliferation in vitro, and trace cells in vitro and in vivo.
体外研究：
1.?染色液制备（1）从冰箱中取出 PKH 67 试剂，静置?分钟?室温，或者 37°C ?浴?刻后，离?盛放 PKH 67 的管?，开盖前请务必离??分钟让试剂充分落?管底后才能开盖。（2）根据需要检测的细胞样品数，?稀释液将探针 10 倍稀释，再?合适的溶液(如：??清培养基，HBSS 或 PBS)将 PKH 67 ?液 25 倍稀释，配制成染??作液。最佳?作液浓度请根据不同细胞和??的实验体系来调整。?般细胞使?按试剂盒中的?液的终浓度 250 倍稀释即可，有些细胞可能需要适当增加浓度。2. 细胞染色（1） 将制备好的待测细胞? 100μL 染??作液重悬，?细胞浓度?约 107/mL。也可以进行原位染?，染?液足够够覆盖细胞即可。（2） 在2-8 °C培养细胞 15-30分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。（注：建议待标记细胞在染??作液中于 37°C 孵育 5 min，再于 4°C 孵育 15 min。低温孵育可降低细胞对染料的内吞作?，有助于染料对质膜的标记，并且降低染料定位细胞质囊泡的可能性。）（3） 离?后去上清，收集细胞，?PBS或??清培养基洗涤细胞 1-2 次，最后加? PBS 或??清培养基重悬细胞。（4） 取 500μL 细胞悬液，?流式细胞仪检测。Ex/Em=490/502 nm。（5） 随后还可按照细胞的正常培养?法进?培养。（6）?可以在荧光显微镜下直接观察标记效果，也可以在培养适当时间后再?流式细胞仪检测细胞增殖，或?于其他特定实验?的的细胞荧光?踪。注意事项（1）染?浓度根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少?异。（2）配制的 PKH 67 ?液极易?解，建议分装保存， ≦-20°C冷冻?燥保存。（3）PKH 67 ?作液应现配现?，不能提前配制，因为 PKH 67 吸?会分解，影响染?效果。（4）PKH 67 易被?解，在?溶液中会很快变质。?液请在使?过程中避免接触?。?作液在标记细胞的过程中和?接触是在许可的时间范围内的。（5）PKH 67 荧光染?剂为?醇溶液，在 4°C、冰浴等较低温度情况下会凝固?粘在离?管管底、管壁或管盖内，从冰箱取出后恢复?室温，变成液体状态后离??管底部再开盖。可以 37°C ?浴?刻?全部融解后使?。（6）不同的细胞种类标记后可以?踪的代次或时间差异较?，请根据实际情况或参考?献进?检测。
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