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编 号:F751475
分子式:C53H59F6N4O2P
分子量:929.03
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生物活性:
Cyanine5 DBCO (DBCO-Cy5) is a low-toxicity azide reactive probe (NIR fluorescent dye), for imaging azide-labeled biomolecules via a copper-free "click-through" reaction. Cyanine5 DBCO has no apparent cytotoxicity or animal toxicity and shows no damage to the physiological functions of cells other than the target cells (azide-labeled cells). Cyanine5 DBCO can be used to label and track cells in vitro and in vivo (Ex=635 nm, Em=650-700 nm)
体内研究:
指南 (以下是我们推荐的方案。此方案仅提供指南,应根据您的具体需求进行修改)。体内细胞追踪: 1. 将含有 2 mL 生长培养基的种子细胞以 3×104 (因细胞而异) 的密度接种到 35 毫米玻璃底培养皿上。 2. 加入Ac4ManNAz (50 μM,终浓度),孵育3天 (在细胞表面产生叠氮基团)。 3. 洗涤用 DPBS (pH 7.4) 对细胞进行两次处理。 4. 对小鼠进行麻醉,然后将细胞 (经过 Ac4ManNAz 处理后) 注入肝左叶。 5. 注入 Cyanine5 DBCO (25 μM,200 μL) 到尾静脉 (3 天 将细胞注射到肝脏后)。 6. 测量 Cyanine5 DBCO 荧光 (Ex=635 nm,Em=650-700 nm)。体内近红外荧光 (NIRF) 图像是通过体内成像系统获得的。

体外研究:
指南 (以下是我们推荐的方案。此方案仅提供指南,应根据您的具体需要进行修改)。 细胞标记 (例如A549细胞): 1. 将 2 mL 生长的种子细胞以 3×104 (因细胞而异) 的密度接种到 35 毫米玻璃底培养皿中 2. 加入Ac4ManNAz (50 μM,终浓度),孵育3天 (在细胞表面产生叠氮基团)。 3. 用 DPBS (pH 7.4) 洗涤细胞两次。 4. 用 Cyanine5 DBCO (20 μM,终浓度) 在 37℃孵育细胞 1 h℃。 5. DPBS (pH 7.4) 冲洗细胞,甲醛-戊二醛联合固定液25℃固定15 min。 6. DPBS 洗涤细胞两次 (pH 7.4) 并用 DAPI 染色细胞以标记细胞核。 7. 使用共聚焦激光扫描显微镜测量 Cyanine5 DBCO 荧光 (Ex=635 nm,Em=650-700 nm)。 注意: 1) 在用 Ac4ManNAz 处理后,Cyanine5 DBCO 可以靶向细胞表面人工引入的叠氮基团超过 3 天。 2) 程度Cyanine5 DBCO 标记具有剂量依赖性。
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