生物活性: Ribonuclease A (EC 3.1.27.5) cleaves RNA 3′ to pyrimidines and actively cleaves RNA at every pyrimidine residue. Ribonuclease A catalyzes the hydrolysis of single stranded RNA in the absence of metal ions or cofactors.
体外研究: RNase A 最常见的应用是在质粒 DNA 或基因组 DNA 制备过程中去除 RNA。RNase A 储备液配制1. 使用 10 mM 的醋酸钠(pH 5.2)制备 10 mg/mL 的RNase A储备液;2. 在 100℃ 条件下加热 15 min;3. 冷却到室温,加入 1/10(v/v)的 1 M Tris-HCl(pH 7.4),调其 pH 至7.4;4. 于 -20℃ 冻存,可稳定保存长达 2 年。注意:在中性条件下煮沸 RNase A 溶液,会有 RNase 沉淀形成;在更低的 pH 下将其煮沸,如有沉淀可能由于蛋白杂质的存在而造成。此时沉淀可通过高速离心(13,000 rpm)去除。