产品
编 号：F493293
分子式：C19H13NO3
分子量：303.31
分子式：C19H13NO3
分子量：303.31
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结构图
CAS No: 87687-02-3
产品详情
生物活性：
Resorufin benzyl ether (BzRes), a fluorogenic enzyme substrate, can be used to detect CYP3A4 enzyme activity. Resorufin benzyl ether modified with a recognizing moiety boronate, can be used for ONOO- detection via a self-immolation mechanism. Ex/Em=530-570 nm/590 nm.
体外研究：
CYP3A4 活性测定:1. 准备反应溶液。a. 标准原液含有 1 mM Resorufin benzyl ether，以其为荧光底物。将 5mg Resorufin benzyl ether 溶解在 1mL 2% w/v 的 Poloxamer 188 (HY-D1005A)、500 mL Dimethyl sulfoxide (HY-Y0320) 和 3.5 mL 乙腈的混合物中。b. 新鲜配制 CYP3A4 酶液。将 5mL 1mM 酶原液与 995 mL 缓冲液稀释，得到 5 nM 酶溶液。2. 测定 CYP3A4 活性a. 在 96 孔板中反应。在每个孔中加入 99 mL 缓冲混合液，1 mL 1 mM Resorufin benzyl ether。调整至最终浓度 5 mM。b. 在 37℃ 孵育 30 分钟之前，转移 100 mL 5 nM 酶液。c. 在激发波长 (lex=570 nm) 和发射波长 (lem=590 nm) 荧光检测下进行酶活性测定。d. 影响 CYP3A4 活性测定的因素。如缓冲液 (磷酸盐、Tris-HCl 缓冲液)、缓冲液浓度 (50-200 mM)、培养时间 (0-50 min)。CYP3A4 代谢活性测定：1. 加入 CYP3A4 酶至最终浓度为 5 pmol/孔。2. 每次反应使用 50 pM 底物和 200 mM 磷酸钾缓冲液。3. 在测量代谢物荧光之前，用 BzRes 孵育 45 分钟。激发波长 (Ex) 为 530 nm，发射波长 (Em) 为590 nm。4. 将全强度提取物的浓度指定为 100% (在最终测定量中稀释为 1:4)。5. 以 1:3 重复稀释两次 100% 提取物。计算荧光值的均值和标准差。
Resorufin benzyl ether (BzRes), a fluorogenic enzyme substrate, can be used to detect CYP3A4 enzyme activity. Resorufin benzyl ether modified with a recognizing moiety boronate, can be used for ONOO- detection via a self-immolation mechanism. Ex/Em=530-570 nm/590 nm.
体外研究：
CYP3A4 活性测定:1. 准备反应溶液。a. 标准原液含有 1 mM Resorufin benzyl ether，以其为荧光底物。将 5mg Resorufin benzyl ether 溶解在 1mL 2% w/v 的 Poloxamer 188 (HY-D1005A)、500 mL Dimethyl sulfoxide (HY-Y0320) 和 3.5 mL 乙腈的混合物中。b. 新鲜配制 CYP3A4 酶液。将 5mL 1mM 酶原液与 995 mL 缓冲液稀释，得到 5 nM 酶溶液。2. 测定 CYP3A4 活性a. 在 96 孔板中反应。在每个孔中加入 99 mL 缓冲混合液，1 mL 1 mM Resorufin benzyl ether。调整至最终浓度 5 mM。b. 在 37℃ 孵育 30 分钟之前，转移 100 mL 5 nM 酶液。c. 在激发波长 (lex=570 nm) 和发射波长 (lem=590 nm) 荧光检测下进行酶活性测定。d. 影响 CYP3A4 活性测定的因素。如缓冲液 (磷酸盐、Tris-HCl 缓冲液)、缓冲液浓度 (50-200 mM)、培养时间 (0-50 min)。CYP3A4 代谢活性测定：1. 加入 CYP3A4 酶至最终浓度为 5 pmol/孔。2. 每次反应使用 50 pM 底物和 200 mM 磷酸钾缓冲液。3. 在测量代谢物荧光之前，用 BzRes 孵育 45 分钟。激发波长 (Ex) 为 530 nm，发射波长 (Em) 为590 nm。4. 将全强度提取物的浓度指定为 100% (在最终测定量中稀释为 1:4)。5. 以 1:3 重复稀释两次 100% 提取物。计算荧光值的均值和标准差。
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