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编 号:F430847
分子式:C11H19ClN4O3
分子量:290.75
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10mM*1mL in DMSO
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生物活性:
Pimonidazole is a novel hypoxia marker for complementary study of tumor hypoxia and cell proliferation in tumor. Pimonidazole accumulates in hypoxic cells via covalent binding with macromolecules or by forming reductive metabolites after reduction of its nitro group, it can be used for qualitative and quantitative assessment of tumor hypoxia .

体内研究:
Pimonidazole 是一种 2-硝基咪唑,在缺氧细胞中被特异性还原激活,并与蛋白质、肽和氨基酸中的硫醇基团形成稳定的加合物。此外,检测到的 Pimonidazole hydrochloride 的量与体内肿瘤内的缺氧水平成正比。为这个有用的工具提供了以下方案来询问体内的缺氧水平. 1.盐酸 Pimonidazole hydrochloride 以 30 mg/mL 的浓度悬浮于 0.9% 无菌生理盐水或 PBS 中。 2.给多只小鼠静脉 (尾静脉) 注射 60 mg/kg 的 Pimonidazole hydrochloride 3.让小鼠体内循环 90 分钟,然后用异氟烷或二氧化碳 (CO2) 对小鼠进行安乐死。注意:对于动物安乐死:符合适当的 IACUC 协议! 4. 处死小鼠,然后取出器官、称重、快速冷冻,并储存在 -80°C 的塑料闪烁瓶中。 5. Pimonidazole hydrochloride 染料可用于石蜡包埋组织、冷冻组织和细胞系。器官嵌入 OCT,置于低温恒温器中,并切成 10 μM 厚的切片。将切片置于显微镜载玻片上进行染色。

体外研究:
Pimonidazole 是一种外源性缺氧标记物,是一种 2-硝基咪唑类化合物,在氧浓度低于 1.3% 时与细胞大分子形成共价键。 检测:免疫组化检测匹莫硝唑可识别缺氧细胞使用小鼠单克隆抗体。用用于增殖细胞核抗原 (PCNA) 的市售单克隆抗体检测细胞增殖。通过光学显微镜定性评估缺氧和细胞增殖,并使用点计数和图像分析软件方法定量评估。然后通过免疫荧光检测 Pimonidazole hydrochloride-蛋白加合物用 Pimonidazole hydrochloride (10-100 μM) 处理细胞 (90% 汇合度) ,再用完全培养基或 PBS 稀释,缺氧或常氧 2-4 小时。然后 HBSS 洗涤细胞 4 次,10% 中性溶液固定 10 分钟在室温下用福尔马林缓冲,用 tris 缓冲盐水洗涤 3 次,并用带有 DAPI 封片剂的 Prolong Gold 封片。为了监测内在缺氧信号,取出组织并胚胎在固定前用 400 μM Pimonidazole hydrochloride 孵育 2 小时。使用针对 Pimonidazole hydrochloride 蛋白加合物的抗体进行免疫染色。
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