产品
编 号：F332549
分子式：C25H27Cl4IN4
分子量：652.23
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CAS No: 3520-43-2
产品详情
生物活性：
JC-1 (CBIC2) is an ideal fluorescent probe widely used to detect mitochondrial membrane potential. JC-1 accumulates in mitochondria in a potential dependent manner and can be used to detect the membrane potential of cells, tissues or purified mitochondria. In normal mitochondria, JC-1 aggregates in the mitochondrial matrix to form a polymer, which emits strong red fluorescence (Ex=585nm, Em=590nm); When the mitochondrial membrane potential is low, JC-1 cannot aggregate in the matrix of mitochondria and produce green fluorescence (ex=514nm, em=529nm).
体外研究：
JC-1 染色液的配制1.1 制备储存液用 DMSO 配制 5 mg/mL 的 JC-1。如用 1 mL DMSO 溶解 5 mg JC-1。注：1) JC-1 储存液建议分装后于 -20℃ 或 -80℃ 避光保存。1.2 工作液的配制用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液，配制成 1-20 μg/mL 的 JC-1 工作液。注：1) 请根据实际情况调整 JC-1 工作液浓度，且现用现配。2) 如果 JC-1 进入细胞的效果不好，可向工作也液中加入适量 20% Pluronic F127 溶液，终浓度为 0.02-0.05%，Pluronic F127 可以防止 JC-1 在缓冲液中聚合并帮助其进入细胞。JC-1染色1) 以6孔板为例进行细胞铺板，密度为 5×105 cells/mL。37℃，5% CO2 培养箱培养过夜。注：进行凋亡诱导时的细胞密度建议不超过 1×106/mL，也可根据自己的细胞类型培养至合适的密度。2) 取 0.5 mL 细胞悬液至无菌的离心管内。3) 400 g 离心 3-5 min；弃上清。 4) 用 1 mL JC-1 工作液重悬细胞，于 37℃，5% CO2 培养箱孵育 15-30 min。5) 室温条件 400 g 离心 5 min；吸掉上清。6) 用 2 mL 细胞培养液或者缓冲液重悬细胞，之后室温条件 400 g 离心 5 min；弃上清，重复两次。7) 用 1 mL 新鲜培养液或者缓冲液重悬细胞，立刻进行后续的流式分析或荧光显微镜观察。8) 数据分析 (流式细胞仪) ：含有红色 JC-1 聚集物的健康细胞线粒体用 FL2 通道检测；含有绿色 JC-1 单体的凋亡或不健康细胞用 FL1 (FITC) 通道检测。注：若用于酶标仪检测，用 300 μL 缓冲液重悬细胞；然后按照每孔 100 μL 的量将染色好的细胞转移到不透光的 96 孔板内，即可进行荧光酶标板分析。
JC-1 (CBIC2) is an ideal fluorescent probe widely used to detect mitochondrial membrane potential. JC-1 accumulates in mitochondria in a potential dependent manner and can be used to detect the membrane potential of cells, tissues or purified mitochondria. In normal mitochondria, JC-1 aggregates in the mitochondrial matrix to form a polymer, which emits strong red fluorescence (Ex=585nm, Em=590nm); When the mitochondrial membrane potential is low, JC-1 cannot aggregate in the matrix of mitochondria and produce green fluorescence (ex=514nm, em=529nm).
体外研究：
JC-1 染色液的配制1.1 制备储存液用 DMSO 配制 5 mg/mL 的 JC-1。如用 1 mL DMSO 溶解 5 mg JC-1。注：1) JC-1 储存液建议分装后于 -20℃ 或 -80℃ 避光保存。1.2 工作液的配制用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液，配制成 1-20 μg/mL 的 JC-1 工作液。注：1) 请根据实际情况调整 JC-1 工作液浓度，且现用现配。2) 如果 JC-1 进入细胞的效果不好，可向工作也液中加入适量 20% Pluronic F127 溶液，终浓度为 0.02-0.05%，Pluronic F127 可以防止 JC-1 在缓冲液中聚合并帮助其进入细胞。JC-1染色1) 以6孔板为例进行细胞铺板，密度为 5×105 cells/mL。37℃，5% CO2 培养箱培养过夜。注：进行凋亡诱导时的细胞密度建议不超过 1×106/mL，也可根据自己的细胞类型培养至合适的密度。2) 取 0.5 mL 细胞悬液至无菌的离心管内。3) 400 g 离心 3-5 min；弃上清。 4) 用 1 mL JC-1 工作液重悬细胞，于 37℃，5% CO2 培养箱孵育 15-30 min。5) 室温条件 400 g 离心 5 min；吸掉上清。6) 用 2 mL 细胞培养液或者缓冲液重悬细胞，之后室温条件 400 g 离心 5 min；弃上清，重复两次。7) 用 1 mL 新鲜培养液或者缓冲液重悬细胞，立刻进行后续的流式分析或荧光显微镜观察。8) 数据分析 (流式细胞仪) ：含有红色 JC-1 聚集物的健康细胞线粒体用 FL2 通道检测；含有绿色 JC-1 单体的凋亡或不健康细胞用 FL1 (FITC) 通道检测。注：若用于酶标仪检测，用 300 μL 缓冲液重悬细胞；然后按照每孔 100 μL 的量将染色好的细胞转移到不透光的 96 孔板内，即可进行荧光酶标板分析。
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